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  • 20178-24
    幾種核酸提取方法

    (1)濃鹽法利用RNP和DNP在電解溶液中溶解度不同,將二者分離,常用的方法是用1MNacl抽提,得到的DNP粘液與含有少量辛醇的CCL3一起搖蕩,使乳化,再離心除去蛋白質,此時蛋白質凝膠停留在水相及CCL3相中間,而DNA位于上層水相中,用2倍體積95%乙醇可將DNA鈉鹽沉淀出來.也可用0.15MNaCL液反復洗滌細胞破碎液除去RNP,再以1MNaCL提取脫氧核糖蛋白,再按CCL3---異醇法除去蛋白.兩種方法比較,后種方法使核酸降解可能少一些.以稀鹽酸溶液提取DNA時,加...

  • 20178-23
    2017年度國自然基金結果公布了!

    ?2017年3月1日至3月20日項目申請集中接收期間,自然科學基金委員會(以下簡稱自然科學基金委)共接收項目申請190840項,經初步審查和復審后共受理187135項。依據《自然科學基金條例》和自然科學基金相關管理辦法,經專家評審和委務會議審批,決定資助面上項目18136項、重點項目667項、重大項目2項、重點(地區(qū))合作研究項目107項、青年科學基金項目17523項、青年科學基金項目399項、創(chuàng)新研究群體項目38項、海外及港澳學者合作研究基金項目142項、地區(qū)科學基金項目3...

  • 20178-22
    蛋白質組學的發(fā)展趨勢

    蛋白質組一詞源于蛋白質與基因組兩個詞的組合,意指“一種基因組所表達的全套蛋白質”,即包括一種細胞乃至一種生物所表達的全部蛋白質。蛋白質組學本質上指的是在大規(guī)模水平上研究蛋白質的特征,包括蛋白質的表達水平,翻譯后的修飾,蛋白與蛋白相互作用等,由此獲得蛋白質水平上的關于疾病發(fā)生,細胞代謝等過程的整體而的認識。近兩年來蛋白質組研究技術已被應用到各種生命科學領域,如細胞生物學、神經生物學等。在研究對象上,覆蓋了原核微生物、真核微生物、植物和動物等范圍,涉及到各種重要的生物學現象,如信...

  • 20178-17
    免疫沉淀實驗

    一、服務介紹免疫沉淀(Immunoprecipitation,IP)是指利用抗體與抗原間的特異性結合特性,將抗原(我們感興趣的靶蛋白)-抗體復合物從樣品中分離出來,達到初步分離純化靶蛋白的目的。之后,樣品可以再進行Westernblot分析。二、實驗原理免疫沉淀是利用抗原與抗體免疫反應達到純化,定性檢測蛋白的目的,即在蛋白質提取液中加入與抗原(靶蛋白質)特異性結合的抗體,抗體與抗原結合后形成免疫復合物,再與蛋ProteinA/G或二抗偶聯的瓊脂糖珠子孵育,通過離心得到免疫復合...

  • 20178-16
    PAS染色法實驗

    一、服務介紹PAS染色法(PeriodicAcid-Schiffstain)在組織學上,主要用來檢測組織中的糖類。過碘酸把糖類相鄰兩個碳上的羥基氧化成醛基,再用Schiff試劑和醛基反應使呈現紫紅色。隨著醫(yī)學實驗技術的發(fā)展,糖原染色應用的范圍更加廣泛,如用以證明與鑒別細胞內空泡狀的性質,心肌病變及其他心血管疾病的診斷,糖原累積病診斷和研究,糖尿病的診斷和研究,用于某些腫瘤的診斷等。二、實驗原理PAS染色又稱過碘酸雪夫染色,糖原染色。PAS染色一般用來顯示糖元和其它多糖物質。過...

  • 20178-10
    高質量RNA提取條件之二

    1.選擇好的RNA分離方法現有眾多的RNA分離方法也許令人難以取舍。目前簡單也是安全的方法是柱式分離,如RNApure因為操作簡單,時間短,純度高而受到大家的喜愛,RNApure不需要DNA酶消化DNA,節(jié)省了時間,避免RNA的降解,從而提高了產量;相對非柱式分離(如TRIZOL),去除蛋白及其他雜質干凈,提高了純度,對于細胞、組織、一般植物均非常適合。植物RNA的提取比較難抉擇,植物RNA提取受酚、多糖、蛋白雜質、次生代謝物含量的影響,一般用TRIZOL提取純度不高,而且很...

  • 20178-9
    高質量RNA提取條件之一

    1.迅速滅活內源的RNA酶,以防止RNA降解。以下3個方法均可有效使內源RNA酶失活:1)用含離液(如胍鹽)的細胞裂解液收獲樣品,并立即勻漿。2)用液氮瞬間凍結樣品。值得特別注意的是:組織塊足夠小,在浸入液氮的瞬間就能凍結,以瞬間令RNA酶失活。3)立即將樣品置于RNAfixer無液氮RNA樣品儲存液中。它是一種水相、無毒的收集試劑,能立即穩(wěn)定并保護完整、未凍結的組織和細胞樣品中的RNA。關鍵要點是組織樣品切片要夠?。ǎ?,這樣RNAfixer才能在RNase破壞RNA之前迅速...

  • 20178-8
    Elisa試劑盒試驗過程中需要特別注意的細節(jié)

    Elisa試劑盒是固相夾心法酶聯免疫吸附實驗(ELISA)、已知濃度的標準品、未知濃度的樣品加入微孔酶標板內進行檢測。先將生物素標記的抗體同時溫育。洗滌后,加入親和素標記過的HRP。再經過溫育和洗滌,去除未結合的酶結合物,然后加入底物A、B,和酶結合物同時作用。產生顏色。顏色的深淺和樣品中的濃度呈比例關系。Elisa試劑盒試驗過程中需要特別注意的細節(jié)1、試劑準備:試劑都在使用前達到室溫,使用后請立即按照說明書要求保存。實驗操作中使用一次性吸頭,避免交叉污染;2.加樣:加樣時,...

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